1999–2000年意大利足球乙級聯賽是自該項賽事創立以來，於意大利舉行的第六十八屆賽事。
阿爾扎諾、費爾馬納、皮斯托伊塞和薩沃亞從意丙聯賽升級，而沙蘭力坦拿、森多利亞、維琴察和安玻里則從意甲聯賽降級。
切塞納降級至2000-01年意丙一級聯賽。
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