克萊豪爾-貝特克試驗

克萊豪爾-貝特克（Kleihauer–Betke, "KB"）測試、克萊豪爾-貝特克（"KB"）染色、克萊豪爾測試或酸洗脫測試，是一種用於測量從胎兒轉移至母親血流中胎兒血紅素量的血液檢測。此檢測通常對Rh陰性母親進行，以確定所需Rho(D)免疫球蛋白（RhIg）的劑量，用以抑制母親體內Rh抗體的形成，並預防未來Rh陽性子女罹患Rh疾病。該測試以其1957年的發表者恩諾·克萊豪爾（Enno Kleihauer）和克勞斯·貝特克（Klaus Betke）命名。

測試詳情

KB測試是量化胎兒-母體出血（FMH）的標準方法。它利用胎兒血紅素對酸的差異性抗性。標準的血液抹片由母親的血液製備，並置於酸浴中。此過程會從紅血球中去除成人血紅素，但胎兒血紅素則不受影響。接著使用Shepard氏染色法進行染色，使胎兒細胞（含有胎兒血紅素）呈現玫瑰粉紅色，而成人紅血球則僅呈現為「鬼影細胞」。在顯微鏡下計數2,000個細胞，並計算出胎兒細胞相對於母體細胞的百分比。

對於檢測結果為陽性者，應在產後檢查時進行追蹤檢測，以排除偽陽性的可能性。偽陽性可能由母親的血紅素病變引起，例如鐮狀細胞性狀，這會導致胎兒血紅素持續升高。

與其他更昂貴或技術更先進的方法（如流式細胞儀）相比，KB染色在檢測FMH方面與這些先進方法同樣靈敏。然而，有文獻指出，與流式細胞儀方法相比，當母體血液樣本中存在F細胞時，KB測試會因偽陽性結果而高估FMH。背景計數誤差可能導致在實際沒有胎兒失血的情況下，估算出高達5一毫升的胎兒失血量，但大多數實驗室採用的標準方法，在發生更嚴重FMH時，出現偽陽性的機率極低。

原始技術

方法

由收集至抗凝劑（如肝素、草酸鹽、檸檬酸鹽或EDTA）中的微血管血液或靜脈血液製備薄抹片。抹片在空氣中乾燥10至60分鐘，於20-22一°C下，在80%（體積百分比）乙醇中固定5分鐘，用自來水沖洗後風乾。接著將抹片浸入檸檬酸鹽-磷酸鹽緩衝液中，於37一°C下作用5分鐘，並輕輕攪動約3分鐘。將玻片用自來水沖洗、乾燥，並以Ehrlich氏酸性蘇木素染色3分鐘，再以水沖洗並再次乾燥。之後用赤藻紅複染3分鐘。最後沖洗後，將抹片乾燥並在光學顯微鏡下檢查。

原始方法的結果

血紅素F細胞被赤藻紅染成深色，血紅素A細胞呈現為鬼影細胞，而中間型細胞則呈現或深或淺的粉紅色。含有血紅素A的網狀紅血球可能呈現為中間型細胞，和/或可能顯示細胞內顆粒。包涵體（亨氏小體、沉澱的α鏈或β鏈）在被洗脫的細胞中可見，為大小不一的緊密包涵物。不論是氧合血紅素、變性血紅素、氰化高鐵血紅素、還原血紅素或一氧化碳血紅素，血紅素A都會被洗脫。

血紅素F細胞的量化

推薦使用由Schneider、Ludwig和Bartsch開發的方法。若要測定血紅素F的細胞內分佈，可採用Shepard、Weatherall和Conley的半定量方法。

正常值

根據Kleihauer最初發表的數據，成人血紅素F細胞的正常值低於0.01%；在足月新生兒中則高於90%。

用途

胎兒-母體出血嚴重程度評估

為確定FMH陽性檢測是否為可能的胎兒死亡原因，應計算胎兒總血容量的損失百分比，並根據以下已知關係進行適當調整：

- 胎兒紅血球的大小是成人紅血球的1.22倍；
- 已知KB染色在檢測胎兒紅血球方面的平均成功率為92%；
- 對於足月或接近足月的孕婦，其母體紅血球平均體積約為1800毫升；
- 胎兒平均血球容積比為50%；以及
- 死產時，胎兒平均血容量為 150 \{ml}{kg}

應用以上條件可得出以下公式：

其中

- PFB 是胎兒失血百分比；
- FC是觀察到的胎兒紅血球數量；
- MC是觀察到的母體紅血球數量（注意：MC = TC - FC，其中 TC 是觀察到的母體與胎兒紅血球總數）；
- FW是死產胎兒的體重（公斤）。

RhD藥瓶數量

估算所需Rho(D)免疫球蛋白藥瓶數量可採用以下公式：

胎兒出血量（毫升） = 胎兒細胞百分比 x 50
所需300微克RhIG藥瓶數量 = 胎兒出血量/30毫升

將這兩個公式合併，可得：

藥瓶數量 = 胎兒細胞百分比 x 50 / 30

這大約等於：

藥瓶數量 = 胎兒細胞百分比 x 1.7

實務上，若小數點右邊的數字≥5，則進位增加一瓶。

死產原因解析

假設進行了一次KB染色，觀察到總紅血球數 TC = 5000，其中發現胎兒紅血球數為 FC = 200。再假設該死產胎兒的體重為 FW = 2.0 kg。那麼我們可以得出結論，胎兒總失血百分比約為：

取五位有效數字。因此我們可推斷該胎兒因FMH損失了其66.667%（三分之二）的血液。一般而言，對於任何PFB \geq 20</math>的數值，死產的可能性都非常高，特別是當胎兒突然大量失血時；在此案例中，我們很可能會懷疑FMH是死產的原因。然而，需要注意的是，這樣的診斷並非完全定論；長時間緩慢失血的胎兒能夠代償這種失血速度；而KB染色無法告訴我們FMH的急性程度。這意味著無法將KB染色陽性及高PFB值與死產完全劃上等號，儘管在許多情況下，若有其他資訊（如已知的遺傳性妊娠併發症），已觀察到FMH與死產之間存在極高的正相關係數 r \approx +1.000</math>。

胎兒紅血球檢測問題

由於胎兒與母體的血球在母體血流中的壽命相同，因此在死產後相當長的一段時間內，仍可透過KB染色獲得有意義的結果。然而，若母體與胎兒的ABO血型不合，則在死產後迅速進行KB染色至關重要，因為胎兒紅血球會被母體血流迅速清除，導致KB染色低估FMH的程度（如果有的話）。文獻中對於分娩後採樣可能導致的偽陽性提出了許多擔憂。一般來說這不成問題。分娩確實會導致微量出血的檢出頻率增加，但這不應混淆將FMH作為死產可能原因的判讀。儘管一些已發表的文獻有所主張，但並無必要在引產、產程開始、分娩、胎盤娩出等過程之前採樣。然而，若要進行剖腹產，未在此之前採樣將導致2%的偽陽性率。

最後，任何導致胎兒血紅素持續存在於母體血球中的情況，都會使判讀變得更加棘手。某些血紅素病變會造成這種情況，其中最常見的是鐮狀細胞性狀。總體而言，大約有1–3%的情況可能因此導致錯誤的判讀。

所有孕婦創傷案例

一篇2004年發表的文章總結道，在所有孕婦創傷案例中，進行克萊豪爾-貝特克（KB）測試是必要的，因為臨床評估對於判斷早產風險不夠敏感。該測試能準確預測孕婦創傷後的早產風險，而文章結論認為臨床評估則無法做到。若KB測試為陰性，創傷後的電子胎兒監測時間可安全地縮短。若KB測試為陽性，則因早產風險顯著，必須進行詳細監測。不論Rh血型狀態如何，KB測試對所有遭受創傷的孕婦都有重要益處。

參見

Apt測試

參考資料

外部連結

[1] 克萊豪爾測試

Category:血液檢測 Category:懷孕期間的檢測